验孕试纸用晨尿验孕，检测的重要指标是胎盘中所分泌的特异性激素HCG，即人体绒毛促性腺激素，女性受孕之后，HCG进入尿液和血液中，在怀孕早期，尿液中的HCG含量较低，不容易检测，人处于睡眠状态的时候，尿液通过身体代谢浓缩，加之睡眠中激素分泌较多，所以晨尿中的HCG浓度比其他时候要高一些，检测早孕也更准确。
验孕试纸不一定要用晨尿，但是由于怀孕早期尿中的激素水平较低，不容易被检测出来，晨尿中的激素浓度比一般其它时间的尿液中的高一些，所以晨尿会相对更准确一些。
验孕试纸晚上用可以，但最好早上检测。因为白天、晚上时人的活动较多，喝水也很多，尿液排空比较快，尿液中的HCG浓度较低，女性晚上用验孕试纸进行自测时结果可能会受到影响。
验孕试纸晚上自测时，由于晚上尿液中的HCG含量没有晨尿中的高，所以准确率或多或少会受到影响，再加上一些女性操作不当，有可能产生的误差也较大。但若是女性怀孕时间较长，则一天中任何时间段都可以检测，不会受到影响。
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